摘要:本课题以阿魏酸酯酶为样品,通过阿魏酸酯酶对农作物秸秆的降解特性的研究,分析和总结了阿魏酸酯酶在各种不同条件下降解麸皮的功效,以期为进一步研究阿魏酸酯酶的价值提供了实践应用指导依据。实验的步骤大体可以分为五个部分,从一开始的培养基的制备,到阿魏酸酯酶的培养,再到阿魏酸酯酶的分离和阿魏酸酯酶的纯化,最后进行阿魏酸酯酶的理化性质研究。
实验研究以0.1g麸皮为降解对象。首先进行阿魏酸酯酶液体培养基的配制,将活化后的霉菌接种到培养皿中进行培养;再进行阿魏酸酯酶固体培养基的配制,将培养皿中的菌液倒入固体培养基中进行培养;分离纯化通过离心机分离,加硫酸铵盐析,用透析袋进行透析;阿魏酸酯酶降解麸皮生成还原糖,通过分光光度计测不同条件下还原糖含量,进行对比试验。
反应之后,得到了阿魏酸酯酶最适反应温度为50℃,最适反应酶量为400μg,最适反应时间为5h,最适反应金属离子为Na﹢,最适反应PH为5。
关键词 培养基;离心;盐析;透析;吸光度
目录
摘要
Abstract
1绪论-1
1.1农作物秸秆的处理方法-1
1.1.1秸秆的物理处理方法-1
1.1.2 秸秆的化学处理方法-1
1.1.3秸秆生物处理法-2
1.2 阿魏酸酯酶-3
1.2.1 阿魏酸酯酶的介绍-3
1.3 本课题的研究背景和研究意义-4
1.3.1 研究背景-4
1.3.2 研究意义-4
2 材料与方法-5
2.1原料与试剂-5
2.2 仪器与设备-5
2.3阿魏酸酯酶粗酶液提取方法-5
2.3.1活化培养-6
2.3.2霉菌酶活检测-6
2.3.3菌液制作-6
2.3.4发酵培养-6
2.4阿魏酸酯酶的分离纯化-7
2.4.1硫酸铵分级沉淀-7
2.4.2透析-7
2.5 阿魏酸酯酶对农作物秸秆降解特性的研究-8
2.5.1阿魏酸酯酶活性的测定方法-8
2.5.2阿魏酸酯酶降解秸秆的最适反应温度-8
2.5.3阿魏酸酯酶降解秸秆的最适反应时间-8
2.5.4阿魏酸酯酶降解秸秆的最适反应pH-8
2.5.5阿魏酸酯酶降解秸秆的最适金属离子-8
2.5.6 阿魏酸酯酶降解秸秆的最适酶量-9
3结果与分析-10
3.1阿魏酸酯酶的制备-10
3.1.1阿魏酸酯酶的提取-10
3.1.2阿魏酸酯酶的分离-10
3.2阿魏酸酯酶的特性分析-11
3.2.1阿魏酸酯酶酶活性的测定-11
3.2.2阿魏酸酯酶降解秸秆最适反应温度-12
3.2.3阿魏酸酯酶降解秸秆的最适反应时间-12
3.2.4 阿魏酸酯酶降解秸秆的最适反应pH-13
3.2.5阿魏酸酯酶降解秸秆的最适金属离子-14
3.2.6 阿魏酸酯酶降解秸秆的最适酶量-15
结论-16
致谢-17
参考文献-18