摘要:本实验以牛脑干粉为原料,提取牛脑蛋白,以多肽得率为指标,采用复合风味蛋白酶对牛脑蛋白进行酶解,制备牛脑多肽(FBPS)。同时对其体外抗氧化活性进行研究,实验结果表明:当添加量为2%,pH值6.5,酶解温度50℃,酶解时间1.5h时牛脑蛋白的酶解效果最好,多肽得率为14.16%。对FBPS进行体外抗氧化研究结果表明:在5-25mg/mL的浓度范围内,水解产物对DPPH自由基清除作用明显,最大清除率为61.32%,IC50为21.74mg/mL;还原能力也一直增加,最大可达0.343,IC50为40.33mg/mL;对超氧阴离子清除效果显著,最大清除率为43.34%,IC50为26.41mg/mL;对羟自由基清除率最大为62.38%,IC50为15.58mg/mL。与中性蛋白酶制牛脑多肽(ABPS)、碱性蛋白酶制牛脑多肽(NBPS)的抗氧化活性进行比较,结果表明ABPS的抗氧化活性大于NBPS的抗氧化活性大于FBPS的抗氧化活性。ABPS的肽谱分析结果表明:ABPS中抗氧化成分与市售脑蛋白水解物片基本一致。
关键词 复合风味蛋白酶;多肽得率;酶解;抗氧化
目录
摘要
Abstract
1 绪论-1
1.1 牛脑蛋白的概述-1
1.1.1 蛋白质的简介-1
1.1.2 多肽的简介-1
1.1.3 营养价值-1
1.1.4 牛脑蛋白的提取工艺-1
1.2 多肽在食品中的应用-2
1.2.1 多肽在食品添加剂中的应用-2
1.2.2 多肽在运动保健食品中的应用-2
1.2.3 多肽在美容食品中的应用-2
1.2.4 多肽在特殊人群食品中的应用-3
1.3 抗氧化的概述-3
1.3.1 抗氧化肽的研究现状-3
1.3.2抗氧化活性的测定方法-4
1.3 立题的背景及意义-4
1.4 本课题研究的主要内容-4
2 材料和方法-6
2.1 实验材料与主要试剂-6
2.2 仪器与设备-6
2.3 实验方法-6
2.3.1 牛脑蛋白的提取方法-6
2.3.2 多肽的提取方法-6
2.3.4 复合风味蛋白酶酶解制备牛脑多肽工艺研究-7
2.3.5 测定方法-8
2.3.6体外抗氧化活性研究-10
2.3.7 多肽的肽谱分析-11
3 结果与分析-14
3.1 牛脑多肽标准曲线的建立-14
3.2 单因素的试验结果-14
3.2.1 复合风味蛋白酶添加量对多肽得率的影响-14
3.2.2 酶解时间对多肽得率的影响-15
3.2.3 酶解温度对多肽得率的影响-15
3.2.4 pH对多肽得率的影响-16
3.2.5 料液比对多肽得率的影响-16
3.3 正交实验结果-17
3.4 验证实验结果-17
3.5 多肽的抗氧化活性测定-18
3.5.1 多肽对DPPH自由基清除率能力-18
3.5.2 多肽的总还原能力的测定-18
3.5.3 多肽的超氧阴离子清除率的测定-19
3.5.4 多肽的羟自由基清除率-20
3.6 多肽的肽谱分析-21
结论-27
致谢-28
参考文献-29