摘要:以芦荟粉为原料,选择不同极性有机溶剂对其分级处理,对其中峰形较多的乙酸乙酯提取馏分进行高速逆流色谱(HSCCC)制备分离。以高效液相色谱测定分配系数法优选出高速逆流色谱分离的最佳溶剂体系,并研究了高速逆流色谱仪的流动相流速、转速、分离温度等因素对芦荟活性成分分离的影响。确定了最佳的HSCCC分离条件:溶剂体系为氯仿-甲醇-正丁醇-水(4:3:0.4:2,v/v),流动相流速2 mL/min、转速800 r/min、水浴温度25℃,经一次HSCCC即可分离得到3个单体组分,经HPLC分析为芦荟苷A、芦荟苷B和芦荟大黄素,纯度分别为95.9%、96%、97.68%。
关键词芦荟蒽醌类;高效液相色谱分析;高速逆流色谱分离
目录
摘要
Abstract
1 绪论-1
1.1芦荟概述-1
1.1.1 芦荟简介-1
1.1.2芦荟组成成分-1
1.1.3 芦荟的应用及展望-2
1.2 蒽醌类物质概述-3
1.2.1 蒽醌类物质概况-3
1.2.2 蒽醌类物质的成分结构及其药理作用-4
1.2.3 蒽醌类物质的提取分离方法-5
1.3 高速逆流色谱技术-5
1.3.1 高速逆流色谱分离技术简介-5
1.3.2 高速逆流色谱技术特点-6
1.4 溶剂体系的选择-6
1.4.1 溶剂体系的分类-6
1.4.2 选择溶剂体系的原则-7
1.5 芦荟蒽醌类化合物分析-7
1.5.1 紫外分光光度法-7
1.5.2 高效液相色谱法-7
1.6 抗氧化性作用机理-8
1.6.1 DPPH自由基的清除作用-8
1.6.2 羟基自由基的清除作用-8
1.7 实验目的与意义-9
2 材料与方法-10
2.1 材料-10
2.1.1 试剂-10
2.1.2 仪器-10
2.2 方法-10
2.2.1 标准样液的配制-10
2.2.2 标准曲线的绘制-11
2.2.3 芦荟粉的提取-12
2.2.4 提取物的定性分析-12
2.2.5 溶剂体系的确定-12
2.2.6 高速逆流色谱的分离-13
2.2.7 分离产物的成分及纯度测定-14
2.2.8 芦荟大黄素的抗氧化性研究-14
3 结果与分析-15
3.1 芦荟蒽醌类化合物的提取-15
3.1.1 不同溶剂的提取效果-15
3.1.2 不同溶剂提取物的成分鉴定-15
3.1.3 最佳溶剂体系的选择-18
3.2 高速逆流色谱的最佳操作条件选择-22
3.2.1 最佳流速的确定-22
3.2.2 最佳温度的确定-23
3.2.3 最佳转速的确定-24
3.2.4 高速逆流色谱分析-24
3.2.5 提取物的纯度鉴定-25
3.3 芦荟大黄素对DPPH自由基清除率的测定-27
结论-28
致谢-29
参考文献-30