摘要:本实验以野生型金线莲(Anoectochilus roburghii)根尖(一种叶脉为金色网状排列,以下简称JX;另一种叶脉为银色网状排列,以下简称YX)和金线莲组培幼苗根尖(以下简称ZP)为材料。采用常规的压片技术,在已研究的金线莲根尖染色体制片实验方法的基础上,进一步探索金线莲根尖不同取材时间、预处理时间、固定时间、解离时间及染色时间对金线莲的染色体制片效果的影响,并初步建立起适用于野生金线莲和组培苗金线莲的制片技术体系。结果表明:金线莲的根尖取材以鲜活幼嫩根尖为最适宜,时间以9:00最佳,用饱和对二氯苯溶液20℃预处理3h,经卡诺氏固定液Ⅱ(甲醇:冰醋酸=3:1)20℃下固定3.5h后,用0.075mol/L的KCl溶液在25℃下前低渗处理30min,然后用解离液(浓盐酸:95%乙醇=1:1)于60℃下水浴解离7min,用双蒸馏水后低渗处理30min,再用改良的苯酚品红染液染色10min后进行压片,能得到更加理想的金线莲根尖染色体制片,且预处理、固定时间均缩短,获得的实验效果更佳理想。
关键词:金线莲;根尖;染色体;制片;技术体系
目录
摘要
Abstract
1.前言-1
1.1金线莲的研究概述-1
1.2植物染色体研究的分析方法-1
1.3植物染色体制片技术-2
1.4植物染色体制片技术研究的意义-2
1.5金线莲染色体及其制片技术的研究现状-2
1.6本研究的目的及意义-3
2.材料与方法-5
2.1实验材料、仪器与药品-5
2.2金线莲植株取材-5
2.3金线莲根尖取材-5
2.4金线莲根尖染色体制片-5
2.5金线莲根尖染色体制片效果分析-6
2.6数据统计与分析-6
3.结果与分析-7
3.1不同预处理时间对金线莲根尖染色体制片效果的影响-7
3.2不同固定时间对金线莲根尖染色体制片效果的影响-7
3.3不同解离时间对金线莲根尖染色体制片效果的影响-8
3.4不同染色时间对金线莲根尖染色体制片效果的影响-9
3.5不同取材时间对金线莲根尖染色体制片效果的影响-10
4.讨论-11
4.1与已研究的实验进行对比-11
4.2不同根尖取材对金线莲根尖染色体制片效果的影响评价-11
5.结论-12
参考文献-13
致 谢-14