摘要:目的：通过本实验建立抗甲型流感病毒药物的细胞筛选模型，应用于抗甲型流感病毒的筛选。并且对多种微生物发酵液进行筛选，确定对甲型流感病毒有一定抑制作用的微生物菌株。
方法：将生长状态良好的MDCK细胞稀释至一定浓度，接种于96孔板；同时设立对照组。再加入适量待筛选发酵液与细胞共同孵育2h后加入适量流感病毒吸附细胞，置于孵箱中培养3~4天，以观察到的细胞病变效应(cytopathic effect，CPE)为指标，进行发酵液的筛选。
结果：发现对甲型流感病毒有抑制作用的发酵液共23种。
结论：此实验建立了抗甲型流感病毒的药筛模型。共筛选发酵液2400种，其中对甲型流感病毒有抑制作用的有23种。本次试验只是对发酵液的最初的筛选，后期需对阳性发酵液进行复筛，以期发现对甲型流感病毒有很好抑制作用的微生物发酵液，供进一步研究。
关键词：甲流病毒，MDCK细胞，细胞病变
目录
摘要
Abstract
引言
1实验材料 2
1.1实验细胞2
1.1.1质粒2
1.1.2实验细胞株2
1.2实验病毒3
1.3实验器材3
1.4实验试剂3
1.4.1细胞培养基3
1.4.2细胞维持液3
1.4.3微生物发酵液3
1.5其他耗材3
2.实验方法 4
2.1质粒转化4
2.2质粒的中量提取4
2.3细胞复试5
2.4 MDCK及HEK 293T细胞培养5
2.5细胞冻存5
2.6甲型流感病毒（IAV）的制备6
2.7病毒滴度的测定6
2.7.1细胞铺板7
2.7.2制备梯度稀释的病毒液7
2.7.3病毒与细胞混合7
2.8阳性对照药物的配制8
2.9抗甲型流感病毒H1N1发酵液筛选方法8
2.10细胞病变（CPE）评价抗病毒疗效8
3.实验结果 9
3.1甲流病毒对细胞的病变作用 9
3.2微生物发酵液的筛选结果 10
4.讨论12
结论
致谢
参考文献
