摘要:本论文以温度、时间、pH、接种量及不同培养基成分为试验因素对长座虫草培养工艺进行了优化,并对其菌丝体中有效成分进行分析,同时考察了菌丝体提取物清除DPPH自由基和发酵液抗菌活性。研究结果表明:以生物量为考察指标时,培养温度25℃、pH6.0、接种量15%,发酵周期6天,生物量最大,为最佳培养条件。在最佳培养条件下,2%玉米粉培养基是最适合长座虫草液体种子发酵的培养基,获得最大生物量,为14.83g/L。菌丝体生物活性物质含量较高,多糖含量49.927mg/g,核苷含量9.201 mg/g,麦角甾醇含量0.851 mg/g。在自由基清除率在20min时达到最高为19.632%,但玉米粉培养基培养的发酵液无抑菌活性。
关键词:长座虫草;菌丝体;发酵液;活性成分
目录
摘要
Abstract
1 绪论-1
1.1虫草的概述-1
1.1.1虫草简介-1
1.1.2 长座虫草-1
1.2 虫草生物活性物质概述-2
1.2.1 核苷类活性物质-2
1.2.2 多糖类物质-3
1.2.3 生物碱类-3
1.2.4 环状肤类-4
1.2.5 酶-4
1.3 虫草的药理活性-4
1.3.1 抗肿瘤作用-4
1.3.2 免疫调节作用-4
1.3.3 调节血糖水平作用-5
1.3.4 抗氧化作用-5
1.3.5 调节心血管和促进呼吸系统功能-5
1.4 本项目研究的目的与意义-5
2 材料与方法-7
2.1 供试菌种-7
2.2 化学试剂-7
2.3 仪器-7
2.4 培养基-8
2.5 实验方法-8
2.5.1 菌种的活化及培养方法-8
2.5.2 摇瓶种子培养的方法-9
2.5.3 培养条件优化方法-10
2.5.4 生物量的测定方法-10
2.5.5 胞内多糖的测定方法-10
2.5.6核苷含量的测定方法-11
2.5.7 麦角甾醇的测定方法-11
2.5.8 DPPH自由基清除方法-12
2.5.9抑菌活性测定方法-12
3 结果与分析-13
3.1 菌丝体生长曲线-13
3.2 非营养因素对菌丝体生物量的影响-13
3.3 不同培养基对生物量的影响-14
3.4 菌丝体多糖含量-14
3.5 菌丝体总核苷含量-15
3.6 菌丝体麦角甾醇含量-16
3.7 菌丝体DPPH自由基清除活性-17
3.8 发酵液抑菌活性-18
3.8.1 SDY培养基培养的发酵液抑菌活性-18
3.8.2 土豆培养基培养的发酵液的抑菌活性-18
3.8.3 玉米粉培养基培养的发酵液抑菌活性-19
3.8.4 黄豆粉培养基培养的发酵液抑菌活性-19
结论-21
致谢-22
参考文献-23