摘要:本文通过从健康鲫鱼肠道内分离细菌菌株，纯化培养各菌株。使用苯酚-氯仿抽提的方法，获得各菌株的基因组DNA。以细菌通用引物8F和1492R通过PCR方法扩增获得各菌株的16S rDNA序列，送到生物公司测序，将序列进行拼接，获得全序列，对菌株进行初步分类。结合实验室以前分离菌株的相关数据和新分离出的菌株，使用16S rDNA序列，确定健康鲫鱼肠道可培养菌株分别属于Aeromonas、Shewanella、Bacillus等，论文将相关菌株的种群特征进行了探讨。
关键词 ：鲫鱼；肠道；细菌；种群多样性
目录
摘要
Abstract
1绪论-1
1.1鱼类肠道细菌的研究-1
1.1.1 鱼类肠道细菌的简介-1
1.1.2鱼类肠道细菌的作用-1
1.1.3鱼类肠道菌群的特性、组成及数量-2
1.2 益生菌-2
1.2.1 益生菌对鲫鱼生长的影响-2
1.2.2益生菌的作用-3
1.3 本研究的意义-4
2实验材料和方法-5
2.1实验材料-5
2.1.1菌株来源-5
2.1.2药品-5
2.1.3 试剂-5
2.1.4 实验仪器-5
2.2实验步骤-6
2.2.1培养基的配置-6
2.2.2高压灭菌-7
2.2.3 鲫鱼肠道菌株的分离-8
2.2.4 菌株保藏-8
2.2.5 革兰氏染色和生理生化分析-9
2.2.6提取细菌组DNA为模板-10
2.2.7 进行PCR扩增16SrDNA-11
2.2.8 利用16S rDNA序列进行鉴定-11
2.2.9 确定肠道菌群的分类-11
3实验结果和讨论-13
3.1 分离到鲫鱼肠道可培养菌株-13
3.2 鲫鱼肠道菌株数目的确定-13
3.3 各菌株的16SrDNA序列-13
3.4 鲫鱼肠道菌群多样性特征-16
3.5 讨论-17
结论-18
致谢-19
参考文献-20
