摘 要:金黄色葡萄球菌是引起食物中毒的重要致病菌之一,检测食品中金黄色葡萄球菌对于预防和控制金黄色葡萄球菌引起的食物中毒具有重要意义。因而,建立快速有效吸附和检测金黄色葡萄球菌的方法变得尤为重要。
本文采用溶剂热法合成了直径为200nm的四氧化三铁磁性纳米粒子,通过方法成功在四氧化三铁上包上了厚度为10nm的二氧化硅层。并通过活化氨基化磁纳米粒子,利用生物素-亲和素的特异性结合能力,成功合成了适配体化四氧化三铁磁性纳米粒子。然后利用适配体与目标物结合的特异性,研究了适配体化的磁纳米对金黄色葡萄球菌的捕获能力。通过优化反应条件后得出:在孵育时间为10min,适配体磁纳米的量为100ul,1mg/mL,菌体量为50ul且浓度不高于105cfu/50uL时,适配体化磁纳米对金葡菌的捕获率可高达99%,并且在杂菌干扰下,吸附率仍能保持在98%以上。此外,我们在实际食品样品中进行了捕获率的实验,分别以牛奶,奶茶,果汁,矿泉水为介质进行实验,从数据分析得知,适配体修饰的磁纳米对金黄色葡萄球菌的吸附效果良好,整体的吸附率在76%-99%。因而,基于适配体化磁纳米对金黄色葡萄球菌的吸附研究对快速检测致病菌有着重要意义,可进一步应用和推广。
关键词:金黄色葡萄球菌,四氧化三铁磁性纳米粒子,特异性吸附
目录
摘要
ABSTRACT
第1章 绪论-1
1.1 免疫磁珠分离技术-1
1.1.1 磁性纳米材料的性质-1
1.1.2 磁性纳米材料的制备-1
1.1.3 纳米磁珠的修饰-2
1.1.4 磁性纳米粒子的应用-2
1.2 金葡菌的检测方法-2
1.2.1 传统检验方法-2
1.2.2 免疫学检测方法-3
1.2.3 分子生物学方法-3
1.2.4 生物传感器检测-3
1.3 课题研究主要内容-4
第2章 磁纳米的制备和吸附试验-5
2.1 引言-5
2.2 实验部分-5
2.2.1 试剂与仪器-5
2.2.2 适配体修饰的四氧化三铁磁性纳米粒子的制备-6
2.2.3 菌株的培养-6
2.2.4 适配体修饰的磁纳米对金黄色葡萄球菌的吸附率的研究-6
2.2.5 特异性吸附试验-7
2.3 结果与讨论-8
2.3.1 适配体修饰的四氧化三铁磁性纳米粒子-8
2.3.2 适配体修饰的磁纳米对金黄色葡萄球菌的吸附率的研究-10
2.3.3 特异性吸附试验-13
第3章 食品样品中适配体修饰的磁纳米对金黄色葡萄球菌的吸附率的研究-15
3.1 引言-15
3.2 实验部分-15
3.2.1 试剂与仪器-15
3.2.2 实验方法-15
3.3 结果与讨论-17
第4章 结论与展望-19
4.1 结论-19
4.2 不足之处及未来展望-19
参考文献-20
致谢-23