摘要:为优化黑虎掌菌多糖的提取工艺,通过单因素试验考察了液料比、浸提温度和浸提时间对黑虎掌菌多糖得率的影响,在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken设计,建立并分析了各因素与多糖得率关系的数学模型;采用乙醇分级沉淀法分离纯化黑虎掌菌多糖,获得了乙醇体积分数为30%、40%、50%、60%、70%条件下沉析出的5个多糖组分SAP-1、SAP-2、SAP-3、SAP-4、SAP-5;以DPPH自由基清除率、还原力、羟基自由基清除率为指标,评价了5个多糖组分的抗氧化活性。结果表明热水浸提黑虎掌菌多糖的最佳工艺条件为液料比为27 mL/g、浸提温度为86.2 ℃、浸提时间为3.3 h,在此条件下黑虎掌菌多糖得率可达10.32%,验证试验表明该模型具有较好的预测性能,可用于指导生产实践;黑虎掌菌多糖各个组分均呈现出较好的抗氧化活性,在一定质量浓度范围内,各个多糖组分对DPPH自由基的清除率、还原力均与多糖质量浓度呈线性正相关;SAP-4的抗氧化能力最强,其清除DPPH自由基的IC50值为0.0309 g/L。
关键词: 黑虎掌菌;多糖;响应面法;分级沉淀;抗氧化活性
目录
摘要
Abstract
1 绪论-1
1.1 黑虎掌菌的研究概况-1
1.1.1 黑虎掌菌的营养成分-1
1.1.2 黑虎掌菌的药用价值-1
1.2 食用菌多糖提取技术的研究进展-2
1.2.1 溶剂浸提法-2
1.2.2 超声辅助提取法-3
1.2.3 微波辅助提取法-3
1.2.4 超临界流体萃取法-3
1.2.5 酶法-4
1.3 多糖纯化技术的研究进展-4
1.3.1 膜分离法-4
1.3.2 有机溶剂萃取法-4
1.3.3 柱层析法-5
1.4 研究意义及内容-5
2 材料与方法-7
2.1 原料与试剂-7
2.2 仪器与设备-7
2.3 方法-8
2.3.1 原料预处理-8
2.3.2 热水提取工艺-8
2.3.3 黑虎掌菌粗多糖得率的测定-8
2.3.4 单因素试验-9
2.3.5 Box-Behnken试验设计-9
2.3.6 黑虎掌菌多糖的乙醇分级沉淀-9
2.3.7 抗氧化活性测定-10
3 结果与分析-11
3.1 葡萄糖标准曲线的制作-11
3.2 单因素试验-11
3.2.1 液料比对多糖得率的影响-11
3.2.2 浸提温度对多糖得率的影响-12
3.2.3 浸提时间对多糖得率的影响-12
3.3 Box-Behnken试验设计-13
3.3.1 回归模型的建立与检验-13
3.3.2 两因素间的交互效应分析-14
3.3.3 最佳条件优化及验证结果-14
3.4 黑虎掌菌多糖的抗氧化活性-15
3.4.1 清除DPPH自由基的能力-15
3.4.2 还原力-16
3.4.3 清除羟基自由基的能力-17
结论-18
致谢-19
参考文献-19