摘要:本试验采用不同浓度(0、0.005%、0.05%、0.5%和5%)的叠氮化钠(NaN3)溶液诱变小麦种子,研究不同浓度溶液诱变处理对小麦生长的影响,并且利用随机扩增多态性DNA(RAPD)分子标记技术,通过PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检测,从分子水平对NaN3诱变小麦的机制进行初步分析。结果表明:不同浓度NaN3诱变小麦种子后,对种子的萌发具有一定的延滞作用,随着NaN3浓度的升高,小麦种子的发芽受到抑制,发芽率显著降低,小麦的根长、茎长和叶长均逐渐的减小。相反,NaN3诱变对小麦可溶性糖、可溶性蛋白、叶绿素等含量均有促进作用,且不同浓度的NaN3诱变后影响效果具有显著差异性,尤其在NaN3溶液为5%时效果最佳;不同浓度的NaN3诱变后小麦幼苗黄酮含量呈上升趋势,但各个处理组之间差异不显著。提取不同浓度NaN3诱变的小麦基因组DNA,分别以F09、E01、B03、H17为引物,对各处理的小麦基因组DNA进行PCR扩增,结果显示各条引物扩增后均出现差异性扩增条带,表明NaN3溶液诱变可以改变小麦的基因组DNA,从而改变小麦的表现性状。
关键词:小麦;NaN3;诱变;RAPD
目录
摘要
Abstract
1.前言-1
1.1小麦的概述-1
1.2 NaN3诱变的原理及研究现状-1
1.3 RAPD标记技术的原理及研究现状-1
1.4研究的目的及意义-2
2.材料与方法-3
2.1材料、仪器及试剂-3
2.2 NaN3诱变小麦种子-3
2.3小麦幼苗的培养-3
2.4外部形态指标的测定-3
2.5可溶性糖含量的测定-4
2.6可溶性蛋白含量的测定-5
2.7黄酮含量的测定-6
2.8叶绿素含量的提取和测定-7
2.9小麦基因组DNA的提取和检测-7
2.10小麦基因组随机多态性DNA的检测-8
2.11数据统计与分析-9
3.结果与分析-10
3.1不同浓度NaN3处理对小麦发芽势和发芽率的影响-10
3.2不同浓度NaN3处理对小麦根长、茎长及叶长的影响-10
3.3不同浓度NaN3处理对小麦的可溶性糖含量的影-10
3.4不同浓度NaN3处理对小麦的可溶性蛋白含量的影响-11
3.5不同浓度NaN3处理对小麦的黄酮含量的影响-11
3.6不同浓度NaN3处理对小麦的叶绿素含量的影响-11
3.7小麦基因组DNA的提取及检测结果-11
3.8小麦基因组随机多态性DNA的检测-17
4.讨论-16
5.结论-18
5.1不同浓度NaN3诱变对小麦幼苗的影响-18
5.2不同浓度NaN3诱变小麦基因组DNA多态性的分析-18
参考文献-20
致谢-22