摘要:目的：通过建立泡沫细胞模型，探讨牛磺酸对巨噬细胞内胆固醇浓度的影响。
方法：采用THP-1细胞为研究对象，经PMA诱导为巨噬细胞后，利用MTT法筛选出对正常细胞增殖无影响的牛磺酸浓度范围。使用诱导成功的巨噬细胞，加入ox-LDL建立泡沫细胞模型，再向其中加入不同浓度的牛磺酸，用油红O染色法测定细胞内脂质含量变化。并建立细胞内总胆固醇和游离胆固醇浓度测定方法。
结果与结论：MTT法结果显示，2、5、10、20mM牛磺酸对细胞增殖无显著性影响，大于30mM的牛磺酸对细胞增殖有抑制作用。THP-1细胞在终浓度为80μg/ml 的ox-LDL下诱导48h，油红O染色显示细胞内脂质含量明显高于正常组的，泡沫细胞模型建立成功。在此基础上加入牛磺酸，结果显示20mM牛磺酸对细胞内脂质含量有降低作用。最后初步建立细胞内总胆固醇浓度和游离胆固醇浓度的检测方法，为今后精确测定细胞胆固醇浓度打下了基础。
关键词：牛磺酸 胆固醇 THP-1细胞
目录
摘要
Abstract
引言
1 材料与方法-2
1.1 材料-2
1.1.1 细胞株-2
1.1.2 主要试剂-2
1.1.2.1细胞培养试剂-2
1.1.2.2油红O（Oil Red）染色试剂-2
1.1.2.3细胞内胆固醇测定试剂-2
1.1.3 主要仪器-3
1.2 实验方法-4
1.2.1细胞培养-4
1.2.1.1细胞复苏-4
1.2.1.2 细胞计数-5
1.2.1.3 细胞传代-5
1.2.1.4细胞冻存-5
1.2.2建立巨噬细胞模型-5
1.2.3巨噬细胞性泡沫细胞模型建立-6
1.2.4 MTT法测定牛磺酸对巨噬细胞增殖影响-6
1.2.5油红O染色-6
1.2.6 细胞内胆固醇测定-6
1.2.6.1测试液的配制-6
1.2.6.2标准品的配制-7
1.2.6.3细胞内胆固醇测定-7
1.2.7 统计学方法-9
2.1泡沫细胞模型建立-10
2.2牛磺酸浓度筛选-10
2.3牛磺酸对细胞内脂质含量的影响-12
2.4细胞内胆固醇测定结果-14
2.4.1胆固醇标准曲线-14
2.4.2 蛋白质标准曲线-14
3 讨论-16
结论
参考文献
致谢
