摘要:淀粉酶是指能够催化淀粉水解转化的一群酶的总称。淀粉酶同时也是一种用途极非常广泛的生物催化剂,可应用于面包制作业、淀粉的糖化和液化、纺织品脱浆、造纸、清洁剂工业、化学、临床医学的分析和制药业等。在食品工业和淀粉酶工业中被广泛利用,国内外对淀粉酶的研究已取得很大的进展。淀粉酶的研制和开发,对于尽快实现国产化生产,满足市场需求,调整我国酶制剂工业的产业结构,节约外汇支出等具有十分重要的意义。
本研究从徐州选取多份土样,用无菌样品袋带回实验室保存备用。从样品中分离筛选出100株细菌菌株,通过初筛和复筛的方法得到八株具有淀粉酶活性的菌株。选取其中一株淀粉酶活性最高的菌株命名为HSM-1,通过对该菌株进行16S rDNA菌种鉴定,初步确定该菌株为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),采用DNS测定方法测定该菌株淀粉酶活性达到 667.97U/ml。通过对HSM-1菌株产生的淀粉酶进行酶学性质初步研究,最终确定该酶的最适温度为30℃,最适pH值为7.0,最佳产酶培养时间为72h。
关键词 淀粉酶;酶活性;筛选
目录
摘要
Abstract
1 绪论-1
1.1淀粉酶的研究概况-1
1.1.1淀粉酶概述-1
1.1.2 淀粉酶的发展史-1
1.1.3淀粉酶的分类-1
1.1.4淀粉酶的应用-2
1.2国内外研究概况-4
1.2.1国内淀粉酶类的生产和应用概况-4
1.2.2国外淀粉酶类的研究现状-5
1.3课题的研究内容及目的和意义-5
2 材料与方法-6
2.1材料-6
2.1.1 样品来源-6
2.1.2 培养基-6
2.1.3主要试剂-6
2.2 仪器与设备-7
2.3 实验方法-8
2.3.1 菌种的分离-8
2.3.2 高产淀粉酶菌株的初筛-8
2.3.3 菌种鉴定-8
2.3.4 产酶菌株的复筛-8
2.3.5 淀粉酶标准曲线的制作-9
2.3.6 最适生长pH确定-9
2.3.7 最适生长温度确定-9
2.3.8 最适生长时间确定-9
3 结果与分析-10
3.1淀粉酶高产菌株的初筛-10
3.1.1 供试菌株-10
3.2淀粉酶高产菌株的复筛-10
3.3标准曲线的绘制-11
3.4 16S rDNA鉴定-12
3.5 酶学性质研究-13
3.5.1最适生长pH确定-13
3.5.2最适生长温度确定-14
3.5.3最适生长时间确定-15
3.6工作展望-15
结论-16
致谢-17
参考文献-18