摘要:呋喃丹作为一种高效、广谱的杀虫剂而被普遍使用。但因其为口属剧毒类农药,国家农药残留标准中已规定其在粮食和蔬菜中不得检出,但还是有人因为其效果高效而违禁使用,这严重危害了消费者的健康。因此,建立快速、灵敏准确、批量的检测方法是势在必行。本研究以经检测过的已合成成功的BFNH-BSA作为免疫抗原,以皮下多点注射法注入到BALB/C 雌性小鼠,刺激其淋巴细胞产生专一性呋喃丹抗体,以BFNH-OVA为包被抗原包被酶标板,通过间接ELISA法测定血清的抗体效价,效价最高者可达1:20000,选出高效价的细胞和骨髓瘤细胞进行细胞融合,制备高亲和力呋喃丹单克隆抗体。
关键词:呋喃丹;ELISA;细胞融合;单克隆抗体
目录
1 绪论-1
1.1 农药概况-1
1.1.1 农药的现状及危害-1
1.1.2 农药的检测方法-1
1.2 呋喃丹概况-3
1.2.1 呋喃丹简介-3
1.2.2 呋喃丹的危害-3
1.3 应用技术简介-4
1.3.1 ELISA简介-4
1.3.2 细胞融合简介-4
1.3.3 单克隆抗体-5
1.4 本论文研究的目的及意义-5
2 材料与方法-6
2.1 实验试剂与仪器-7
2.1.1 实验试剂-7
2.1.2 实验主要溶液系统-7
2.1.3 实验仪器-7
2.1.4 实验材料-8
2.2 实验方法-8
2.2.1 动物免疫-8
2.2.2 细胞融合-9
2.2.3 单克隆抗体细胞的筛选及初步鉴定-11
3 结果与分析-12
3.1 包被抗原最适反应浓度的确定-12
3.2 免疫小鼠多抗血清的检测结果-12
3.3 细胞融合与筛选-12
3.4 间接竞争ELISA的结果-13
结论-14
致谢-15
参考文献-16