摘要:本研究以实验室保存的高产醋酸菌为出发菌株,研究菌株的培养条件,得出菌株产乙醇脱氢酶(ADH)的最优条件如下:最适pH为6.0,最适温度为32℃,最佳装液量为50 mL,最佳接种量为10%,此条件下最高酶活为0.409 U/mL。并对ADH粗酶液的酶学特性做了详细研究,结果显示ADH的最适作用pH值在4.0-7.0,pH值为4.0时酶活力达到最大,pH值为4.0-7.0时酶活力较为稳定;ADH的最适作用温度为35℃,温度为25-40 ℃时酶活力较稳定。Mg2+是ADH的激活剂,K+对酶活的影响不是很大,Ca2+、Na+、Ba2+、Al3+、Zn2+、Mn2+是该酶的抑制剂。
关键词:醋酸杆菌;酶学性质;乙醇脱氢酶;产酶条件;优化
目录
摘要
Abstract
1 绪论-1
1.1 食醋与食醋产业-1
1.1.1 食醋的概述-1
1.1.2 我国食醋产业的发展状况-1
1.2醋酸菌的研究进展及应用-1
1.2.1醋酸菌的概述-1
1.2.2醋酸菌的生物学特性-2
1.2.3醋酸菌的改良-2
1.2.4 醋酸菌的生理及代谢调控-2
1.3乙醇脱氢酶的研究进展及应用-3
1.3.1 乙醇脱氢酶的概述-3
1.3.2 乙醇脱氢酶的应用-3
1.3.3 乙醇脱氢酶的分离和纯化方法-4
1.4 本论文的研究意义和内容-5
1.4.1 本论文的研究意义-5
1.4.2 本论文的研究内容-5
2 材料和方法-6
2.1 实验材料-6
2.1.1 菌种-6
2.1.2 主要实验仪器-6
2.1.3 主要实验试剂-6
2.1.4 培养基-7
2.2 试验方法-7
2.2.1 菌种的斜面活化-7
2.2.2 种子液摇瓶培养-8
2.2.3 发酵培养-8
2.2.4 产酶条件的优化-8
2.2.5 乙醇脱氢酶酶活的测定-8
2.2.6 乙醇脱氢酶酶学性质的研究-9
3.结果与分析-11
3.1 产酶条件的优化-11
3.1.1 培养温度的优化-11
3.1.2 发酵培养基初始pH值的优化-11
3.1.3 装液量的优化-11
3.1.4 接种量的优化-12
3.2 酶学性质的研究-12
3.2.1 最适温度的研究-12
3.2.2 温度稳定性的研究-13
3.2.3 最适pH的研究-14
3.2.4 pH稳定性的研究-14
3.2.5 金属离子对酶活的影响-15
结论-16
致谢-17
参考文献-18