摘 要:食品蛋白在加工过程中很容易受到氧化修饰,有研究发现摄食氧化蛋白会对机体产生不良影响。但是蛋白氧化后的产物很多,摄食氧化蛋白造成机体的氧化损伤的机制还没有很深入的研究。本课题主要以蛋白氧化产物中的双酪氨酸(DT)为研究对象,探究摄食DT对大鼠肠道氧化还原状态的影响。
研究方法:1. 采用H2O2-Cu体系制备DT,进行纯化,测量DT含量;2. 短期灌胃DT观察0.5、1.0、1.5、2.0、2.5h内大鼠血液DT浓度变化;3. 饲喂大鼠不同DT水平日粮24w后,观察大鼠血液、十二指肠和空肠ROS水平以及抗氧化物酶活性的变化,以及肠道蛋白氧化相关指标(羰基、DT、AOPPs以及3-NT)的变化。
论文主要研究结果如下:1. 用DT灌胃大鼠发现大鼠血液中DT含量随时间的增加而增加,灌胃2.5hDT含量比灌胃前上升70%;2. 用不同剂量DT饲喂大鼠24w后,会引起大鼠血液、十二指肠和空肠的氧化应激,抗氧化物酶(GPx、SOD、CAT)活力、总抗氧化能力(T-AOC)显著下降(P <0.05),ROS水平显著上升;并造成组织中蛋白氧化代谢产物(羰基、DT、AOPPs、3-NT)积累(P <0.05),并且DT造成的机体肠道的氧化损伤与饲料中DT的添加量呈剂量依赖性,添加硫辛酸(LA)虽可以缓解DT造成的氧化应激,但不能恢复正常。
结论:食源性DT可以被机体吸收进入血液,并且机体在长期摄入DT后会引起肠道的氧化应激反应并且导致肠道组织的蛋白氧化损伤,LA可以缓解这种氧化损伤。
关键词:DT;肠道;氧化应激;氧化损伤
目录
摘要
ABSTRACT
第1章 绪 论-1
1.1 概述-1
1.2双酪氨酸(DT)的产生及其研究进展-1
1.2.1 DT的形成条件-1
1.2.2 DT对机体健康的影响-2
1.3 立题意义与研究内容-3
第2章 实验材料与方法-5
2.1 实验材料-5
2.1.1 主要实验原料及试剂-5
2.1.2 主要实验仪器及分析工具-5
2.1.3 实验动物-5
2.2 实验方法-5
2.2.1 双酪氨酸(DT)的制备与纯化(H2O2-Cu氧化法)-5
2.2.2 双酪氨酸(DT)及3-硝基酪氨酸(3-NT)含量的检测-6
2.2.3 大鼠灌胃实验设计-7
2.2.4 大鼠饲喂实验设计-7
2.2.5 检测大鼠脏器中氧化还原指标的变化-8
2.2.6 数据统计与分析-8
第3章 实验结果与分析-9
3.1 DT吸收特性的研究-9
3.2 长期饲喂DT对大鼠血液和肠道氧化还原状态的影响-9
3.2.1 长期饲喂DT对大鼠血液和肠道ROS水平的影响-9
3.2.2 长期饲喂DT对大鼠血液和肠道SOD活性的影响-10
3.2.3 长期饲喂DT对大鼠血液和肠道GPx活性的影响-11
3.2.4 长期饲喂DT对大鼠血液和肠道CAT活性的影响-12
3.2.5 长期饲喂DT对大鼠血液和肠道T-AOC水平的影响-13
3.3 长期饲喂DT对大鼠血液和肠道的氧化损伤-14
3.3.1 长期饲喂DT对大鼠血液和肠道羰基水平的影响-14
3.3.2 长期饲喂DT对大鼠血液和肠道DT水平的影响-15
3.3.3 长期饲喂DT对大鼠血液和肠道AOPPs水平的影响-16
3.3.4 长期饲喂DT对大鼠血液和肠道3-NT水平的影响-17
第4章 结论与展望-19
4.1结论-19
4.2不足之处及未来展望-19
参考文献-20
致谢-23