二氟沙星人工抗原的合成与抗体制备.doc

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摘要:兽药残留超标造成的危害越来越大,已越来越受到社会的关注和高度重视,已严重影响了人民生活。为进行兽药多残留快速检测生物芯片的研究与开发,以二氟沙星为原料,采用碳二亚胺法和氯甲酸异丁酯法(混合酸酐法),将二氟沙星与载体蛋白偶联,制备二氟沙星完全抗原,经过FeCl3显色反应实验表明,反应产物经彻底透析后,透析内液(即交联产物)呈橙黄色且略显浑浊,BSA的特征吸收峰在277nm处,吸光值A277为O.49;DIF的最大吸收峰在274nm处,吸光值A274为2.82;BSA与DIF形成的偶联物的吸收峰在278nm,吸光值A278为1.14,证明了偶联的成功。采用常规免疫方法免疫BALB/c小鼠,制备得到了抗体血清。

 

关键词 二氟沙星;碳二亚胺法;偶联;动物免疫

 

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 二氟沙星的简介-1

1.1.1 二氟沙星的结构与合成-1

1.1.2 二氟沙星的一般制剂-1

1.2 二氟沙星的应用研究-1

1.2.1 毒理学研究-1

1.2.2 药代动力学研究-2

1.2.3 药效学研究-3

1.2.4 残留及耐药性-4

1.3 本实验的实验内容与拟解决的主要问题-5

1.3.1 实验内容-5

1.3.2拟解决的主要问题-5

1.4 本实验的目的与意义-5

2 材料与方法-7

2.1 实验材料与试剂-7

2.1.1 实验材料-7

2.1.2 实验试剂-7

2.2 试验的设备与仪器-7

2.3 实验方法-7

2.3.1 PBS的制备-7

2.3.2 二氟沙星人工抗原的合成-8

2.3.3 二氟沙星人工抗原的鉴定-8

2.3.4 二氟沙星抗体的制备与鉴定-8

3 结果与分析-9

3.1 二氟沙星抗原鉴定结果-9

3.2 SDS-PAGE结果-9

3.3 二氟沙星抗体血清的鉴定结果-10

结论-11

致谢-12

参考文献-13