虾青素酯的酶催化水解条件优化.doc

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  • 更新时间:2017-01-09
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摘要:本文利用脂肪酶处理雨生红球藻萃取物获取较高比例虾青素单体,为虾青素单体的工业制备摸索工艺条件。使用工程菌脂肪酶与含有虾青素酯的雨生红球藻提取物在水包油的乳化体系下进行酶反应,通过调节酶用量、缓冲液pH值,反应时间、反应温度和乳化剂种类,在水解产物中获得50%比例以上的游离态虾青素。优化后反应条件为:反应温度30℃;KH2PO4-K2HPO4缓冲对,pH值9.0;反应时间2h;虾青素酯质量浓度0.1mg/mL;1微克虾青素酯所对应的酶用量为64U(固体酶粉)/8U(含脂肪酶的工程菌发酵液)。

 

关键词:虾青素,脂肪酶,乳化,高效液相色谱

 

目录

摘要

Abstract

引言-1

1实验材料-3

1.1材料-3

1.2试剂-3

2实验方法与步骤-4

2.1实验方法-4

2.1.1构建虾青素酯水解反应脂肪酶催化体系-4

2.1.2HPLC-C18检测条件-4

2.2实验步骤-4

2.2.1工程菌发酵液中脂肪酶的催化条件探索-4

2.2.2脂肪酶粉的催化条件探索-5

2.3数据处理-6

3实验结果与分析-7

3.1实验结果-7

3.1.1HPLC-C18检测脂肪酶催化反应中游离态虾青素的生成情况-7

3.1.2工程菌发酵液中脂肪酶在既定条件对虾青素酯的水解情况-8

3.1.3脂肪酶粉的催化条件在既定条件对虾青素酯的水解情况-9

3.2结果分析-10

3.2.1HPLC-C18检测脂肪酶催化反应中游离态虾青素的生成情况-10

3.2.2工程菌发酵液中脂肪酶在既定条件对虾青素酯的水解情况-10

3.2.3脂肪酶粉的催化条件在既定条件对虾青素酯的水解情况-10

4讨论-12

结论-13

参考文献-14

致谢-15