葡萄糖法快速筛选牛蒡根中的糖苷酶抑制剂.doc

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摘要:目的:葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD法),是医学判断及研究的临床血糖检测方法,其操作简单、反应速度快,因此本文实验中运用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法可以快速筛选牛蒡根中的α-葡萄糖苷酶抑制剂(AGI)。方法:先将牛蒡根洗净去皮后,干燥、粉碎,用乙醇浸提,再用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取。接着运用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法检测所生成的葡萄糖量,比较牛蒡根各提取物对小鼠空肠α-葡萄糖苷酶(AG)活性的抑制效果。结果:五个不同提取液中,对小鼠糖苷酶活性影响最为明显的是乙酸乙酯相提取物,当乙酸乙酯相提取物浓度等于62.5μg/mL时,最大抑制率为68%;并且乙酸乙酯相的抑制类型为竞争型抑制。

 

关键词  牛蒡;α-葡萄糖苷酶抑制剂;葡萄糖法

 

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 牛蒡-1

1.1.1 概述-1

1.1.2 功能活性的相关研究-1

1.2 α-葡萄糖苷酶抑制剂(AGI)-3

1.2.1 概论-3

1.2.2 作用机理及性质-3

1.2.3 对糖尿病治疗的相关研究-4

1.2.4 对肿瘤治疗的相关研究-4

1.2.5 对艾滋病(AIDS)治疗的相关研究-5

1.2.6 对心血管疾病治疗的相关研究-5

1.3 AGI的筛选方法—葡萄糖法(GOD-POD法)-5

1.3.1 概述-5

1.3.2 测定方式—葡萄糖(GLU)测定试剂盒-6

1.4 本课题的研究意义及主要内容-6

1.4.1 研究意义-6

1.4.2 研究的主要内容-6

2 材料与方法-7

2.1 材料-7

2.1.1 原料-7

2.1.2 试剂-7

2.1.3 仪器-7

2.2 方法-7

2.2.1 牛蒡肉的醇提与提取-7

2.2.2 葡萄糖标准曲线的绘制-8

2.2.3 小鼠α-糖苷酶的获取-8

2.2.4 牛蒡根中AGI筛选模型的建立及抑制率的计算-8

2.2.5 抑制作用类型的确定-9

3 结果与分析-10

3.1 葡萄糖的标准曲线的绘制-10

3.2 阿卡波糖对AG活性的抑制-10

3.3 牛蒡根不同提取物对AG的抑制-10

3.3.1 牛蒡根醇提物对AG的抑制-10

3.3.2 牛蒡根乙酸乙酯萃取相对AG的抑制-11

3.3.3 牛蒡根石油醚萃取相对AG的抑制-11

3.3.4 牛蒡根正丁醇萃取相对AG的抑制-12

3.3.5 牛蒡根水萃取相对AG的抑制-12

3.4 对小鼠糖苷酶IC50值的计算-13

3.5 抑制作用类型的判断-13

结论-15

致谢-16

参考文献-17