摘要:本实验考察了有机溶媒法、环糊精包和法对亚麻刺盘孢霉(Colletotrichum lini)羟化去氢表雄酮(DHEA)为7α-OH-DHEA和7,15α-OH-DHEA的影响,并初步阐释了环糊精在羟化过程中的影响机制。研究结果表明:有机溶媒法中添加4%的二甲基亚砜和6%的聚乙二醇分别提高转化产物7,15α-OH-DHEA的产率10%、12%;环糊精包合法中加入与底物等摩尔比M-β-CD、HP-β-CD,底物转化率均高达100%,转化周期由60 h缩短至48 h,7α-OH-DHEA和7,15α-OH-DHEA的总得率分别提高14.08%,11.55%,;X-衍射、DSC及热力学实验表明环糊精与底物能形成稳定的包合物并显著提高底物、产物的溶解性,同时环糊精的加入对菌体细胞膜通透性有一定程度的影响,造成转化产物7α-OH-DHEA和7,15α-OH-DHEA比例发生变化。
关键词:亚麻刺盘孢霉;去氢表雄酮(DHEA);三羟基雄甾烯酮(7,15α-OH-DHEA);羟化;有机溶媒法;β-环糊精包和法
目录
摘要
ABSTRACT
第1章 绪论-1
1.1 甾体药物的结构和分类-1
1.2 甾体药物的研究发展史-1
1.3 甾体的羟基化反应-2
1.3.1 概述-2
1.3.2 羟化反应的机制-2
1.3.3 甾体羟基化反应的应用实例-3
1.4 甾体化合物生物转化的技术难点-3
1.4.1 亲水性有机溶剂提高甾体底物的溶解度-3
1.4.2 环糊精包和技术-3
1.4.3 双液相体系中甾体的微生物转化-4
1.4.4 固定化细胞转化技术-4
1.5 立题背景和意义-4
1.6 本课题研究的主要内容-5
第2章 材料与方法-7
2.1 实验材料-7
2.1.1 菌种-7
2.1.2 主要仪器-7
2.1.3 主要试剂-7
2.1.4培养基-7
2.2 实验方法-8
2.2.1菌株的培养-8
2.2.2底物转化-8
2.2.3产物检测方法-8
2.2.4 Bradford蛋白浓度测定的原理及方法-8
2.2.5 X-衍射(XRD)表征CDs/DHEA包合物-9
2.2.6差示热量扫描(DSC)表征CDs/DHEA包合物-9
第3章 结果与讨论-11
3.1有机溶媒法-11
3.1.1不同有机溶剂对亚麻刺盘孢霉(C.lini)转化DHEA的影响-11
3.1.2有机溶剂浓度对亚麻刺盘孢霉(C.lini)转化DHEA的影响-11
3.1.3有机溶剂对亚麻刺盘孢霉(C.lini)转化DHEA过程的影响-12
3.1.4有机溶剂浓度对DHEA溶解度的影响-13
3.2环糊精包和法-14
3.2.1环糊精对亚麻刺盘孢霉(C.lini)转化DHEA的影响-14
3.2.2环糊精对DHEA、7,15α-diOH-DHEA溶解度的影响-15
3.2.3环糊精包和法对亚麻刺盘孢霉转化DHEA过程的影响-16
3.2.4环糊精对亚麻刺盘孢霉(C.lini)细胞膜通透性的影响-18
3.2.5 X-衍射(XRD)表征CDs/DHEA包合物-18
3.2.6 DSC表征CDs/DHEA包合物-20
3.2.7 CDs/DHEA包合物的包合比-21
3.2.8 CDs/DHEA包合物热稳定性研究-21
第四章 结论与展望-23
4.1 结论-23
4.2 展望-23
参考文献-25
致谢-27