摘要:目的:鲢鱼鱼皮含有丰富的胶原蛋白,胶原蛋白及其肽类有多种生理功能。本文研究鲢鱼鱼皮胶原蛋白肽的最佳提取工艺及此肽的抗氧化性,为鲢鱼鱼皮的深入研究及提高附加值提供一些理论依据。
方法:采用中性蛋白酶和碱性蛋白酶酶解鲢鱼鱼皮胶原蛋白,通过单因素实验、Box-Behnken试验设计及响应面分析分别确定2种酶酶解鱼皮胶原蛋白的最佳工艺参数,并对此条件下酶解得到的鱼皮胶原蛋白肽进行抗氧化活性研究。
结果:中性蛋白酶酶解鱼皮胶原蛋白的最佳条件为:温度48.9℃,时间3.4h,pH6.9,此时水解度为37.12%。在此条件下酶解得到的鱼皮胶原蛋白肽具有有效地清除OH·自由基和DPPH·自由基能力。碱性蛋白酶酶解鱼皮胶原蛋白的最佳条件为:温度51.3℃,酶浓度2.1%,pH9.1,此时水解度38.58%。在此条件下酶解产生的鱼皮胶原蛋白肽具有有效地清除OH·自由基和DPPH·自由基能力。
结论:在最优条件下,中性蛋白酶和碱性蛋白酶酶解产物对OH·自由基和DPPH·自由基均具有明显的清除效果,且清除效果与浓度之间存在明显的量效关系。
关键字:鲢鱼鱼皮胶原蛋白;中性蛋白酶;碱性蛋白酶;Box-Behnken;抗氧化性活性
目录
摘要
Abstract
1 绪论-1
1.1鱼胶原蛋白的概况-1
1.1.1鱼皮胶原的特性-1
1.1.2鱼胶原蛋白的利用-1
1.2酶解鱼胶原蛋白-2
1.2.1酶水解的优点-2
1.2.2酶的选择-2
1.2.3酶解工艺的研究-3
1.3抗氧化性活性的研究-3
1.3.1抗氧化肽-3
1.4研究意义及主要内容-3
1.4.1研究意义-3
1.4.2研究的主要内容-3
2 材料与方法-5
2.1 材料-5
2.1.1 原料-5
2.1.2 试剂-5
2.1.3 仪器-5
2.2 方法-6
2.2.1 流程-6
2.2.2 酶解工艺优化设计-6
2.2.3 水解度的测定-7
2.3 抗氧化活性的测定-7
2.3.1 对羟基自由基清除率的测定[39]-7
2.3.2 对DPPH·自由基清除率的测定-8
3 结果与分析-9
3.1 单因素试验-9
3.1.1 中性蛋白酶水解鱼胶原蛋白工艺-9
3.1.1.3 酶解温度的影响-10
3.1.1.4 酶解时间的影响-10
3.1.2 Box-Behnken试验-11
3.2 碱性蛋白酶水解鱼胶原蛋白工艺-13
3.2.1 单因素试验-13
3.2.2 Box-Behnken试验-15
3.3 鱼皮肽抗氧化活性-18
3.3.1 对羟基自由基的清除率-18
3.3.2 对DPPH·自由基的清除率-19
结论-20
致谢-21
参考文献-22