摘要:蟹味菇富含多种维生素以及氨基酸,特别是赖氨酸和精氨酸含量不低,因此蟹味菇的活性多肽具备很丰富的营养价值,能够益智增高,减少胆固醇,还能够延缓衰老,起到美容的效果。本文研究了蟹味菇多肽的最佳提取工艺和该肽的抗氧化活性,目的是为了促进蟹味菇活性肽的研究与开发,使其得到更好的利用。
首先从干货蟹味菇中提取蟹味菇蛋白,然后用中性蛋白酶酶解蟹味菇蛋白,得到相应的活性多肽,整个过程利用单因素和正交相结合的实验方法,得到制备蟹味菇蛋白和用中性蛋白酶酶解该产物的最优实验条件,并检测了该产物的抗氧化活性,最终获得了以下结果。蛋白质提取的最优条件是:液料比12mL/g,温度35℃,时间35min,pH值9,在此条件下蛋白的提取率为10.69%;中性蛋白酶酶解的最佳条件为:酶浓度5%、pH值7、酶解温度50℃,此时水解度为27.02%。从抗氧化实验中得出蟹味菇活性肽具有有效地清除OH自由基和氧自由基的能力,并且其效果和浓度之间有显著地的量效关系。
关键词 蟹味菇;制备;多肽;抗氧化
目录
摘要
Abstract
1 绪论-1
1.1 蟹味菇简介-1
1.1.1 基础知识-1
1.1.2 蟹味菇特性和营养价值-1
1.2 蛋白质的提取方法-1
1.2.1 碱提酸沉法-1
1.2.2 TCA-丙酮沉淀法-1
1.2.3 反胶团萃取法-2
1.2.4 醇洗法-2
1.3 蛋白肽的制备方法-2
1.3.1 溶剂提取法-2
1.3.2 酶法-2
1.3.3 微生物发酵法-3
1.3.4 膜法分离技术-3
1.3.5 固相合成法-3
1.3.6 利用重组DNA技术合成活性肽-3
1.4 抗氧化性测定方法-3
1.4.1 FRAP法-3
1.4.2 ORAC法-4
1.4.3 TRAP法-4
1.4.4 PCL法-4
1.4.5 ABTS法-4
1.4.6 DPPH法-4
1.4.7 羟基自由基法-4
1.5 本课题的研究意义及主要研究内容-5
2 材料与方法-6
2.1 原料与试剂-6
2.2 仪器与设备-6
2.3 方法-6
2.3.1 蟹味菇蛋白提取-6
2.3.2 蟹味菇蛋白酶解-7
2.3.3 蟹味菇活性肽抗氧化能力研究-8
3 结果与分析-9
3.1 蟹味菇蛋白提取-9
3.1.1 单因素试验-9
3.1.2 蛋白质提取正交试验-11
3.2 蟹味菇蛋白酶解-11
3.2.1 单因素试验-11
3.2.2 中性蛋白酶水解正交试验-14
3.3 蟹味菇蛋白肽抗氧化研究-14
3.3.1 ORAC法测定蟹味菇活性肽抗氧化能力-14
3.3.2 蟹味菇活性肽清除羟基自由基能力测定-16
结论-18
致谢-19
参考文献-20