摘要:植酸酶作用于米糠后能够大幅提高米糠溶液中无机磷含量。本实验采用黑曲霉产生的植酸酶作用于米糠,考查在不同条件(底物浓度、酶加量、pH、温度)下的脱磷作用,并对脱磷条件进行优化。根据单因素实验和正交试验确定最终的最优条件,即酶加量为161.04U、底物浓度为40mg/mL、水解温度为50℃、pH为3。考查时间对米糠中磷释放量的影响,水浸泡时米糠中磷含量几乎不变,约为1.53mg/mL,酶液浸泡时米糠中磷含量4h达到最大为7.27mg/mL,此时植酸的水解率为91.11%。
关键词 黑曲霉;植酸酶;米糠;脱磷;优化
目录
摘要
Abstract
1 绪论-1
1.1植酸酶简介-1
1.1.1植酸酶的分类-1
1.1.2植酸酶的作用机理-1
1.1.3 植酸酶的应用-1
1.2 影响酸性植酸酶活性的因素-3
1.2.1 温度-3
1.2.2 pH-3
1.2.3 钙水平-4
1.2.4其它矿物离子-4
1.3植酸酶在米糠脱磷作用中的应用-4
1.4 本论文研究的意义和研究内容-5
1.4.1 本论文研究意义-5
1.4.2 本论文研究内容-5
2 材料与方法-6
2.1 实验材料-6
2.1.1 供试菌株-6
2.1.2 主要仪器-6
2.1.3 主要试剂-7
2.2 实验方法-8
2.2.1 斜面活化-8
2.2.2 液体发酵-8
2.2.3 粗酶液的制备-8
2.2.4 植酸酶活的测定-8
2.2.5 磷浓度的测定-11
2.2.6脱磷条件的优化-12
2.2.7 最优条件下米糠中磷释放量随时间的关系-13
3 实验结果与分析-14
3.1 单因素实验-14
3.1.1酶加量对植酸酶脱磷的影响-14
3.1.2底物浓度对植酸酶脱磷的影响-14
3.1.3水浴温度对植酸酶脱磷的影响-15
3.2 正交试验-16
3.3植酸酶酶解米糠游离磷随时间的释放-17
3.4米糠中植酸的水解率-18
结论-19
致谢-20
参考文献-21