摘要:本实验利用0.5％蜗牛酶和1％纤维素酶制备黑曲霉原生质体，在再生培养基中加入不同浓度的LiCl对原生质体进行诱变，将再生菌株进行液态发酵，并检测其植酸酶活力，从中获得一株酶活为16.24 U/mL的突变株，比出发菌株提高23.3%，该菌株具有良好的遗传稳定性。通过对不同诱变剂量下原生质体再生周期、原生质体存活率、菌株的植酸酶酶活等因素的研究，可以考虑将0.15% LiCl作为最佳诱变剂量，继续对黑曲霉原生质体进行诱变，以获得酶活更高的菌株。
关键词 植酸酶；黑曲霉；原生质体；氯化锂；诱变；液态发酵
目录
摘要
Abstract
1 绪论-1
1.1植酸酶的种类及来源-1
1.1.1植酸酶的种类-1
1.1.2植酸酶的来源-1
1.2植酸酶的性质-1
1.3植酸酶的应用与发展-2
1.3.1植酸酶的应用-2
1.3.2植酸酶的发展前景-2
1.4原生质体的生物学特性-2
1.5黑曲霉原生质体的制备及再生-3
1.5.1原生质体的制备-3
1.5.2原生质体的再生-4
1.6优良菌株的选育方法-4
1.7诱变育种的步骤与方法-5
1.7.1出发菌株的选择-5
1.7.2出发菌株的纯化-5
1.7.3单孢子悬液的制备-5
1.7.4诱变剂种类的选择-5
1.7.5不同诱变的处理方式-6
1.8黑曲霉原生质体诱变育种技术研究进展-6
1.9本文研究的意义和内容-7
1.9.1本文研究的意义-7
1.9.2本文研究的内容-7
2 材料与方法-8
2.1实验材料-8
2.1.1菌种-8
2.1.2主要仪器-8
2.1.3主要试剂-9
2.2实验方法-10
2.2.1斜面活化-10
2.2.2原生质体的制备-10
2.2.3原生质体的诱变-11
2.2.4液态发酵-11
2.2.5植酸酶活性的测定-12
2.2.6菌种稳定性实验-14
2.2.7产酶曲线的测定-14
3实验结果与分析-15
3.1标准曲线的绘制-15
3.2原生质体的制备与再生-15
3.3原生质体的诱变-16
3.3.1诱变剂对原生质体再生周期的影响-16
3.3.2诱变后形态上的差异-16
3.3.3不同诱变剂量对存活率的影响-18
3.3.4初始菌株及突变株酶活的检测-19
3.3.5最佳剂量的确定-21
3.4遗传稳定性-21
3.5产酶曲线-22
结论-23
致谢-24
参考文献-25
