PTEN载体的构建、表达和纯化.doc

  • 需要金币500 个金币
  • 资料包括:完整论文
  • 转换比率:金钱 X 10=金币数量, 即1元=10金币
  • 论文格式:Word格式(*.doc)
  • 更新时间:2017-01-11
  • 论文字数:4515
  • 当前位置论文阅览室 > 论文模板 > 医学论文 >
  • 课题来源:(晓萱)提供原创文章

支付并下载

摘要:目的:PTEN是重要的抑癌基因,对于肿瘤的治疗、研究等需要大量的PTEN蛋白。构建PTEN-pet28a重组载体,在大肠杆菌中进行原核重组表达。IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE检测。 方法:将构建好的PTEN-pet28a质粒导入大肠杆菌BL-21,IPTG诱导,电泳检测所产生的蛋白。随后用8mol尿素进行溶解,SDS-PAGE检测融解情况。 结果:发现所需蛋白存在于包含体内,几乎不存在上清中。 结论:通过本实验能够诱导出所需的目的蛋白,但存在包含体内。包涵体溶解,为后续实验做准备。

 

关键词:PTEN  诱导蛋白   包涵体溶解

 

目录

摘要

Abstract

引言.1

1 材料与方法.2

1.1 材料.2

1.2方法..2

1.2.1 GST-PTEN-pet2原核表达载体构.2

1.2.1.1目的基因与pet-28a质粒连接.  .  2

1.2.2 转入大肠杆菌BL-21及诱导基因表达 .2

1.2.2.1重组载体的转化. . .2

1.2.2.2 目的蛋白的诱导表达及检测   .3

1.2.2.3 PTEN表达菌株的扩大培养及诱导3

1.2.2.4 目的蛋白的检测. .  3

1.2.3  包含体的溶解. 3

1.2.3.1  超声溶解包涵体.3

1.2.3.2 变性剂溶解包涵体.3

1.2.3.3 包涵体溶解效果检测. 3

2 结果4

2.1 双酶切结果4

2.2 基因检测结果.4

2.3 蛋白诱导结果.5

2.4批量诱导蛋白观察结果6

2.5 包涵体溶解情况7

2.6 变性剂溶解情况7

结论.8

致谢.9-10

参考文献..11