摘要:目的：PTEN是重要的抑癌基因，对于肿瘤的治疗、研究等需要大量的PTEN蛋白。构建PTEN-pet28a重组载体，在大肠杆菌中进行原核重组表达。IPTG诱导蛋白表达，SDS-PAGE检测。 方法：将构建好的PTEN-pet28a质粒导入大肠杆菌BL-21，IPTG诱导，电泳检测所产生的蛋白。随后用8mol尿素进行溶解，SDS-PAGE检测融解情况。 结果：发现所需蛋白存在于包含体内，几乎不存在上清中。 结论：通过本实验能够诱导出所需的目的蛋白，但存在包含体内。包涵体溶解，为后续实验做准备。
关键词：PTEN 诱导蛋白 包涵体溶解
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摘要
Abstract
引言.1
1 材料与方法.2
1.1 材料.2
1.2方法..2
1.2.1 GST-PTEN-pet2原核表达载体构.2
1.2.1.1目的基因与pet-28a质粒连接. . 2
1.2.2 转入大肠杆菌BL-21及诱导基因表达 .2
1.2.2.1重组载体的转化. . .2
1.2.2.2 目的蛋白的诱导表达及检测 .3
1.2.2.3 PTEN表达菌株的扩大培养及诱导3
1.2.2.4 目的蛋白的检测. . 3
1.2.3 包含体的溶解. 3
1.2.3.1 超声溶解包涵体.3
1.2.3.2 变性剂溶解包涵体.3
1.2.3.3 包涵体溶解效果检测. 3
2 结果4
2.1 双酶切结果4
2.2 基因检测结果.4
2.3 蛋白诱导结果.5
2.4批量诱导蛋白观察结果6
2.5 包涵体溶解情况7
2.6 变性剂溶解情况7
结论.8
致谢.9-10
参考文献..11
