粘帚霉的发酵及剂型的制备_生物技术.doc

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  • 更新时间:2016-07-07
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摘  要: 目的:通过生防菌株ACM941的 50L固体发酵试验,控制发酵条件使发酵产孢量达到1×108个孢子/克培养基;通过开展化学农药可湿粉剂型的常用助剂对生防菌株ACM941孢子活力影响的研究,获得生物学相容性良好的助剂,为研制粘帚霉产品的可湿粉剂奠定基础。

   方法与结果:生防菌株ACM941的50L固体发酵试验,通过优化发酵温度、通气量、搅拌频率、补水量等发酵条件,经显微镜进行镜检,观察发酵产孢量。设发酵温度分别为25℃和30℃,结果30℃下产孢量优于25℃;搅拌时间选择20min和10min,结果显示10min发酵产孢量优于20min的发酵产孢量;通气量选择15 L/min和发酵初期为15 L/min,三天后通气量为20 L/min,发酵结果显示后者的发酵条件优于前者的发酵条件。

   由于固体发酵产物的存在非常不稳定,因此需要将发酵产物与常用的助剂(包括载体、湿润剂、保护剂、稳定剂)进行混合使它稳定存在。方法为按一定的浓度进行梯度稀释,在琼脂培养基中进行培养,观察形成的单菌落数,并进行计数。与不加任何助剂的发酵产物形成的单菌落数进行比较,选出合适的助剂。5种保护剂中甲基纤维素促进了孢子的萌发,因此甲基纤维素为最适保护剂。稳定剂为羧甲基纤维素钠,按照发酵产物和羧甲基纤维素钠分别以10:1、20:1、30:1(质量比)比例混合, 结果为20:1的比例混合对孢子的萌发影响不大,而10:1和 30:1对孢子的萌发具有抑制作用,因此20:1比例为最适稳定剂。2种润湿分散剂中十二烷基苯磺酸钠比十二烷基硫酸钠对孢子的影响小,因此选择十二烷基苯磺酸钠为最适湿润分散剂。5种载体中高岭土对孢子的萌发具有促进作用,因此选择高岭土为最适载体。

   结论:生防菌株ACM941的50L的固体发酵实验得出的较适发酵条件为:温度30℃,搅拌时间10min,通气量发酵初期15 L/min三天后为20 L/min;含水量42%-56%,发酵产孢量达到了2.1×108个孢子/克培养基。加入保护剂甲基纤维素促进了孢子的萌发。稳定剂中羧甲基纤维素钠按照20:1的比例混合与对照组进行比较对孢子的萌发影响不大,而羧甲基纤维素钠10:1羧甲基纤维素钠30:1对孢子的萌发具有抑制作用加入润湿分散剂十二烷基苯磺酸钠和十二烷基硫酸钠对孢子的萌发均有抑制作用,但是十二烷基苯磺酸钠比十二烷基硫酸钠对孢子的影响小。加入载体高岭土对孢子的萌发具有促进作用。说明菌株生防菌株ACM941的孢子具备开发为可湿性粉剂的条件。

 

关键词:生防菌株ACM941, 固体发酵, 可湿粉剂 ,孢子活力

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