摘要:本文研究:从已纯化的小球藻中,在无菌条件下分离提取出内生菌SH1、SI1和SI2菌,然后进行纯化培养,再进行提取DNA进行PCR。经测序后获得其基因组序列,使用BLAST等相关软件分析得到的对比序列。可以初步确定三种菌种均是芽孢杆菌。分析小球藻与SH1、SI1、SI2菌的关系是以测量小球藻中叶绿素a的含量为标准。测量方法是以提取藻内叶绿素a(超声波提取法),再测其吸光度(紫外可见光分光光度机)。根据所得数据,绘制小球藻的生长曲线得到SH1、SI1、SI2菌与小球藻的关系。最终确定SH1、SI1、SI2是三种具有抑制藻类生长特性的菌株。
关键词:小球藻;内生菌;DNA提取;芽孢杆菌;相关生长曲线
目录
摘要
Abstract
1 绪论-1
1.1 藻类-1
1.1.1 藻类简介综述-1
1.1.2 藻资源的现状与开发前景-1
1. 2 小球藻-2
1.2.1 小球藻简介-2
1.2.2 小球藻的功能用途-2
1.2.3 小球藻的研发利用情况-3
1.2.4 小球藻的繁殖与保藏-3
1.2.5 小球藻的培养技术-3
1.3 藻内生细菌-4
2 实验材料与方法-6
2.1 实验材料-6
2.1.1 实验药品-6
2.1.2 主要仪器和设备-6
2.2 实验方法-7
2.2.1 培养基制备-7
2.2.2 灭菌及无菌操作-8
2.2.3小球藻内生菌的分离与纯化-9
2.2.4 DNA的提取及菌种的鉴定-10
2.2.5 16S rDNA的序列鉴定及分析-11
2.2.6 菌种的保藏与活化-11
2.2.7 小球藻生长过程是否与SH1、SI1、SI2菌有关系的测定步骤-12
2.2.8 小球藻的生长情况的测定-13
3 结果与讨论-15
3.1 菌种的筛选与纯化-15
3.2 PCR及电泳结果-15
3.2.1 电泳图-15
3.2.2 PCR测序及分析-16
3.3 SH1、SI1、SI2与小球藻生长关系-18
3.3.1 小球藻生长情况-18
3.3.2 小球藻生长曲线-18
3.4 讨论与分析-19
3.4.1 基因组DNA的提取-19
3.4.2 16S rDNA序列的分析-20
3.4.3 SH1、SI1、SI2菌与小球藻的生长关系-20
结论-21
致谢-22
参考文献-23