摘要:樟芝为台湾特有的天然药用真菌,具有广泛的生物活性,如保肝、抗乙型肝炎、抗癌、抗氧化性、抗炎症等。野生樟芝资源严重短缺,采用生物技术方法液态发酵培养樟芝菌丝体是目前最经济、最符合环保要求的方法。本研究前期研究发现樟芝发酵后期会产生数量较多的无性孢子,因此本论文进一步尝试利于孢子作为接种物,研究樟芝快速循环发酵工艺。
首先,研究了樟芝无性孢子的保存方法。通过研究比较了无菌水、20%蔗糖、20%海藻糖、15%甘油4种不同保护剂在不同温度条件下对孢子的保护效果。发现15%甘油有助于孢子的短期保藏,为孢子接种物的制备工艺奠定了研究基础。
其次,比较了斜面接种和孢子接种两种不同接种方式下的分批发酵,证明孢子接种具有使发酵过程可控性高,菌体生长均匀的优势。
最后,在以孢子为接种物分批发酵的基础上,建立了樟芝快速循环发酵工艺,克服了传统发酵工艺周期长,易染菌等问题,提高了生产强度。
关键词:樟芝;孢子保藏;发酵工艺
目录
摘要
ABSTRACT
第1章 绪论-1
1.1 立题背景及意义-1
1.2 国内外研究现状-1
1.2.1 樟芝简介-1
1.2.2 国内外研究-2
1.2.3 本实验室前期研究-3
1.3 本课题的主要任务和目标-3
第2章 材料与方法-5
2.1 实验材料与仪器-5
2.1.1 实验材料-5
2.1.2 实验仪器-5
2.2 实验方法-5
2.2.1 樟芝菌丝体培养-5
2.2.2 光学显微镜观察-5
2.2.3 孢子悬液的制备-5
2.2.4 保护剂和条件的选择-5
2.2.5 培养方式-6
2.2.6 生物量测定-6
2.2.7 还原糖量测定-6
2.2.8 发酵动力学参数计算-6
第3章 结果与分析-7
3.1 孢子短期保存结果-8
3.1.1 保存1周后的结果-8
3.1.2 保存2周后的结果-8
3.1.3 保存4周后的结果-9
3.1.4 小结-10
3.2 循环发酵结果-11
3.2.1 分批发酵结果-11
3.2.2 5L发酵罐循环发酵结果-12
3.2.3 10L-100L发酵罐循环发酵结果-13
3.2.4 小结-13
第4章 结论与展望-15
4.1结论-15
4.2不足之处及未来展望-15
参考文献-17
致 谢-19