摘要:论文筛选产低温纤维素酶菌株，并进行鉴定和初步发酵条件的分析。采集农田土壤和农产品果实表皮，通过培养和刚果红平板法筛选分离产纤维素酶菌株。利用16SrDNA 通用引物对菌株基因组DNA 进行扩增，分析16S rDNA序列的同源性，对菌株进行鉴定。采用DNS 法测定所产纤维素酶酶活。结果显示，分离得到一株产低温纤维素降解细菌T34，初步鉴定其芽胞杆菌Bacillus。该菌在20℃培养48h时酶活达到最大值，为1.43U/mL•mim。
关键词：细菌；纤维素酶；低温；筛选
目录
摘要
Abstract
1绪论-2
1.1 纤维素酶-2
1.1.1 纤维素酶组成及来源-2
1.1.2 纤维素酶的作用机理-2
1.1.3 纤维素酶的应用-3
1.2 本研究的意义-5
2 实验材料和方法-6
2.1 试验材料-6
2.1.1 菌株的来源-6
2.1.2 主要化学试剂及药品-6
2.1.3 主要仪器设备-6
2.1.4 培养基的配置-7
2.1.5 高压灭菌-7
2.2 菌株筛选方法-8
2.2.1 菌株初步筛选-8
2.2.2 产纤维素酶菌株的筛选-8
2.2.3 菌株保藏-9
2.3 菌种的鉴定-9
2.3.1 生长曲线的制作-9
2.3.2 菌株基因组DNA的提取-9
2.3.3 16SrDNA序列分析-10
2.4纤维素酶特性-10
2.4.1 羧甲基纤维素钠 (CMC-Na) 法-10
2.4.2 葡萄糖标准曲线的绘制-11
2.4.3 发酵时间对纤维素酶的发酵影响测定-11
2.4.4 温度对纤维素酶的发酵影响测定-12
2.4.5 金属离子对纤维素酶活的影响测定-12
3 实验结果和结论-13
3.1 筛选到产低温纤维素酶菌株-13
3.2 菌株T34生长状况分析-13
3.3 基因组DNA提取结果-14
3.4 16SrDNA扩增结果-14
3.5 16SrDNA测序分析-14
3.6 T34产纤维素酶分析-15
3.6.1 葡萄糖标准曲线的绘制-15
3.6.2 发酵时间分析-15
3.6.3 发酵温度分析-16
3.6.4 金属离子对纤维素酶活的影响测定-16
结论-17
致谢-18
参考文献-19
